ISSN 2410-7751 (Print)
ISSN 2410-776X (Online)
Biotechnologia Acta Т. 18, No. 1, 2025
P. 55-66 , Bibliography 29 , англ.
UDC: [615.454.1:577.112.6]+[616-08-031.84:616-001.4]
DOI: https://doi.org/10.15407/biotech18.01.055
Full text: (PDF, in English)
ОДЕРЖАННЯ ТА ОЦІНЮВАННЯ in vitro РЕКОМБІНАНТНОГО HB-EGF ЛЮДИНИ ДЛЯ ЗАГОЮВАННЯ РАН І ТАРГЕТНОЇ ТЕРАПІЇ
І. Вовк1, А. Дідан1, Д. Жукова1, Л. Дронько2, А. Ребрієв1, А. Рибалко1, Є. Легач3, О. Горбатюк4, М. Усенко5, А. Скварчинський6, А. Сіромолот1,6, С. Романюк1, Д. Колибо1
1Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України, Київ
2Національний технічний університет України «Київський політехнічний інститут імені Ігоря Сікорського»
3Інститут проблем кріобіології та кріомедицини НАН України, Харків
4Інститут генетичної та регенеративної медицини, «Національний науковий центр
Інститут кардіології, клінічної та регенеративної медицини імені академіка М.Д. Стражеска НАМН України», Київ
5Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Київ
6Навчально-науковий центр «Інститут біології та медицини» Київського національного університету імені Тараса Шевченка, Україна
Мета. Оцінювання біологічної активності рекомбінантного гепарин-зв’язувального EGF-подібного фактора росту людини (rhHB-EGF) на фібробластах миші in vitro та можливості його застосування як потенційного агента для стимулювання загоєння ран та регенерації тканин.
Методи. У дослідженні застосовували міграційний тест (scratch assay) для вивчення міграції фібробластів миші (L929 та NIH-3T3), MTT-тест для оцінювання проліферації та/або метаболічної активності клітин, MALDI-TOF мас-спектрометрію для ідентифікації протеїнів і проточну цитометрію для визначення життєздатності клітин.
Результати. У діапазоні концентрацій 500–1000 нг/мл rhHB-EGF не зафіксовано цитотоксичного ефекту. Натомість виявлено підсилення проліферації та/або метаболічної активності, а також міграції фібробластів з максимальним ефектом при 500 нг/мл rhHB-EGF у середовищі інкубації клітин. Продемонстровано 30% заростання раневої поверхні фібробластів у scratch assay-тесті за впливу rhHB-EGF порівняно з відповідним контролем.
Висновки. rhHB-EGF у концентрації 500 нг/мл може використовуватися у складі препаратів для стимулювання загоєння ран і регенерації тканин завдяки здатності стимулювати проліферацію/метаболічну активність та міграцію фібробластів, а також відсутності цитотоксичності. Для докладного вивчення цієї можливості надалі є необхідним проведення відповідних досліджень in vivo.
Ключові слова: гепарин-зв’язувальний EGF-подібний фактор росту людини (rhHB-EGF), рекомбінантний протеїн, культура клітин, фібробласти, проліферація, міграція, цитотоксичність, загоєння ран.
© Інститут біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України, 2025